微生物检验在临床诊断和治疗中起着至关重要的作用。它不仅能帮助医生确定感染是否由微生物引起,还能指导选择有效的抗生素,提高治疗效果,减少不必要的抗生素使用。然而,在微生物检验过程中,常常会遇到一些常见问题。本文将对这些问题进行探讨,并提出相应的解决方法。
一、样本收集与运输问题
样本的采集必须使用适当的技术和工具,以确保样本的代表性和纯净性。例如,使用无菌容器收集尿液,对于咽喉拭子,则需采用无菌拭子,并避免触碰到非目标区域以防止交叉污染。采集后,样本需迅速进行适当的处理,如加入营养或保护介质以保持病原体活性。对温度和光照条件有特定要求的样本,如细菌和病毒,需要在冷藏或冷冻条件下运输,避免长时间的运输延迟和震动。
解决方法:严格遵循样本采集和运输的标准操作规程,确保样本的完整性和代表性。同时,加强检验人员的培训,提高他们的操作技能和责任心。
二、菌落总数的测定问题
在菌落总数的测定中,有时会出现只测定一个稀释度的情况,但这并不推荐。因为无法确定所选稀释度是否适宜,可能导致计数和报告的不确定性。此外,同一稀释度的两个平板,菌落总数可能一个在计数范围内,一个不在计数范围,这时应以在计数范围内的平板的菌落数乘以稀释倍数作为报告结果。
解决方法:根据样品污染状况的估计,选择1个到3个适宜稀释度的样品匀液进行检测。即使一个样品已经基本可以确定了菌落数,也建议多检测一个稀释度以进行验证。同时,加强实验室质量控制,确保计数结果的准确性和可靠性。
三、培养基配置与使用问题
培养基的配置需要注意灭菌温度、琼脂培养基的反复溶化、培养基的反复灭菌等问题。含糖量较高的培养基温度不应太高,以免糖分焦化影响质量。琼脂培养基不能反复溶化,以免破坏营养成分。培养基不能反复灭菌,同样会导致营养成分的破坏。
解决方法:严格按照培养基的配置标准进行操作,确保灭菌温度、时间和方法的准确性。对于已经凝固后重新融化的培养基,应弃置不用,避免使用不符合要求的培养基。同时,加强培养基的保存和管理,确保其在有效期内使用。
四、药敏试验结果解读问题
药敏试验结果的解读需要专业知识和经验,医生会结合患者的病史、症状和其他检查结果综合判断。然而,有时会出现涂片镜检结果与培养结果不吻合的情况,或者今日培养结果与前一日不同的情况。
解决方法:加强检验人员的专业知识培训,提高他们的药敏试验技能和结果解读能力。同时,建立药敏试验结果的复核机制,确保结果的准确性和可靠性。对于不一致的结果,应进行重新采样或使用其他诊断方法进一步确认。
综上所述,微生物检验中的常见问题涉及样本收集与运输、菌落总数的测定、培养基配置与使用以及药敏试验结果解读等方面。通过加强检验人员的培训、提高操作技能、加强实验室质量控制和建立复核机制等措施,可以有效地解决这些问题,提高微生物检验的准确性和可靠性。
于金艳 河北省霸州市疾病预防控制中心
