在疾病检查中，有时人们会提出这样的疑问：已经做了常规病理检查，为什么还要做免疫组化？下面就让我们一起来了解一下。
一、常规病理检查
首先，我们先来了解一下常规病理检查。病理诊断是大部分疾病诊断的“金标准”。一般情况下，对于常见的肿瘤类型，病理医生可以通过HE染色观察组织/细胞形态学变化完成病理诊断，这就是常规病理检查。但是，一些肿瘤类型在组织学上非常相似，并且一种肿瘤可能有很多不同的亚型，所以，在相当的病理诊断中，病理医生仅靠HE染色切片，单靠形态学，很难做出比较客观、准确、可靠的诊断。
但是，常规病理检查有一定的局限性。
一是形态学诊断的主观性。尽管HE染色后的组织切片为病理医生提供了直观的图像，但其诊断过程仍依赖于病理医生的经验和专业知识，因此存在一定的主观性。不同病理医生对于相同标本的解读可能会存在差异，尤其是在肿瘤的亚型区分或良恶性判断上。其次，对于病变不够典型，细胞数量较少的病变，仅仅靠HE染色，难以甄别诊断。
二是难以识别微小变化。常规病理检查主要依赖于肉眼观察，对于细胞水平的细微变化，如蛋白质表达的情况，往往无法直接识别。其次，HE染色缺乏特异性标记。当肿瘤的形态学不足以确定其原发位置时，仅依赖HE染色可能无法确定肿瘤的起源，而免疫组化通过检测特定抗原的表达，能够提供更精确的线索。
三是预后评估的局限。虽然HE染色可以提供一些预后信息，但这些指标并不一定能全面反映肿瘤的生物学行为。例如，细胞增殖活性的判断，如果仅依赖于核分裂象的数量，可能会有较大误差。
二、免疫组化是什么？
免疫组化即免疫组织化学，又称免疫细胞化学，是带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项检查技术。简单的说，就是用已知的抗体检测组织细胞里面特定的未知抗原。
三、免疫组化检测为什么需要那么长时间？
因为免疫组化检测是一个比较复杂的操作流程。下面就让我们来简要了解一下免疫组化操作流程：
1.切片厚3-4微米，60℃烤片2小时以上，脱去玻片组织上的蜡，梯度乙醇去除脱蜡液，之后充分水洗切片。
2.阻断组织细胞内非特异性抗原5-10分钟，之后充分洗涤。
3.使用高PH值修复液，高温修复组织细胞3-20分钟，以暴露组织细胞的抗原位点，之后充分洗涤。
4.滴加特异性抗体，37℃湿盒孵育60分钟或4℃过夜，之后充分洗涤。
5.滴加二抗检测系统，室温湿盒孵育30分钟，之后充分洗涤。
6.滴加新鲜配制的DAB显色试剂，作用3-5分钟，之后终止显色并水洗去除多余试剂。
7.复染，水洗，分化，水洗；脱水、透明，封片。
经历了这么多繁琐的流程，最后才到微镜下观察、判读。整个过程需要一定的时间才能完成。
四、免疫组化的作用和意义
1.高度特异性。免疫组化通过识别和结合特定的蛋白质，能够区分形态学相似，但生物学行为不同的肿瘤来源及其亚型。比如，Tg是甲状腺来源肿瘤的特异性标记物、PSA是前列腺及其肿瘤的特异性标记物、CK是上皮来源的特异性标记物，LCA是淋巴细胞来源的特异性标记物。免疫组化的特异性表达可以帮助医生鉴别地进行客观、准确、可靠诊断。
2.检测微小病变。如果正常组织里面出现了少数的可疑异形细胞，但又不够典型，或分化不够成熟，这时候就好像雾里看花，仅凭常规病理检查难以做出清楚的病理诊断。这时候就需要依靠免疫组化来鉴别是否为肿瘤细胞，是良性还是恶性肿瘤细胞。
3.辅助鉴别诊断。免疫组化能够识别肿瘤细胞的特征性标记，这对于诊断和鉴别诊断具有重要意义。如肺腺癌的TTF-1和NapsinA表达阳性，肺鳞癌则表达为阴性；CD3或CD20阳性则提示相关淋巴瘤。
4.寻找转移灶来源。在寻找肿瘤的原发位置时，免疫组化通过检测特定抗原在不同组织中的表达，为医生提供了宝贵的线索。如Tg阳性提示肿瘤为甲状腺来源，PSA阳性则提示前列腺来源。
5.预后评估工具。通过检测如Ki67、PCNA等增殖标记物，P53抑癌标志物，免疫组织化学可以量化细胞增殖的活性，为预后评估提供更准确的指标，有助于指导治疗决策。
6.指导个体化治疗。随着靶向治疗的兴起，免疫组化在检测如ER、PR、HER2、PD-L1、ALK等蛋白表达上扮演了重要角色，这些信息有助于选择针对特定靶点的药物，实现更个性化的治疗。
总结的来说，病理免疫组化染色检查的作用是定性、定位、预后和指导治疗。免疫组化染色检查作为常规病理检查的补充检查，提供了更为深入和准确的诊断信息。它帮助医生在面对复杂疾病时，能够做出更为准确的判断和制定更有效的治疗方案。
陈晓童 玉林市第一人民医院
